Γραμμάριο αρνητικός ζύμωση λακτόζης

Διαφοροποιητικά βακτήρια ζύμωσης λακτόζης αρνητικά κατά Γραμμάριο Τα

βακτηριακά μέσα καλλιέργειας όπως το άγαρ MacConkey μπορούν να διαφοροποιήσουν τα αρνητικά κατά Gram βακτήρια με βάση τον μεταβολισμό της λακτόζης τους. Χρησιμοποιείται σε ερευνητικές και κλινικές εφαρμογές για βακτήρια που ζυμώνουν λακτόζη. Τα gram-αρνητικά βακτήρια που ζυμώνουν λακτόζη σχηματίζουν ροζ αποικίες, ενώ τα αρνητικά κατά gram που δεν ζυμώνουν λακτόζη σχηματίζουν υπόλευκες, αδιαφανείς αποικίες. Ο ρυθμός ανάπτυξης διαφορετικών ειδών βακτηρίων που ζυμώνουν λακτόζη είναι επίσης ένας παράγοντας.

Προσαρμοστικά ένζυμα

Τα προσαρμοστικά ένζυμα για τα αρνητικά κατά Gram βακτήρια παίζουν κεντρικό ρόλο στη ζύμωση της λακτόζης. Μέλος της ομάδας Aerogenes, αυτά τα βακτήρια μπορούν να ζυμώσουν τη λακτόζη πολύ διαφορετικά από τα αντίστοιχα ταχέως ζυμώσιμα. Επιπλέον, αυτοί οι οργανισμοί μπορούν να εξημερωθούν για να ζυμώσουν τη λακτόζη με αυξημένο ρυθμό. Ωστόσο, λίγες εξηγήσεις είναι γνωστές για την προέλευση των διαφορών στη ζύμωση της λακτόζης.

Οι λακτόκοκκοι έχουν μια στενή σύζευξη μεταξύ του μεταβολισμού τους και του μεταβολισμού του σακχάρου. Η ποσότητα λακτόζης που μπορούν να ζυμώσουν θα καθορίσει τον αριθμό των ενζύμων που παράγουν. Επιπλέον, οι λακτόκοκκοι έχουν την ενσωματωμένη ικανότητα να μεταπηδούν από την ομογαλακτική ζύμωση σε μικτής όξινης ζύμωσης, με αποτέλεσμα την παραγωγή αιθανόλης, οξικού και μυρμηκικού. Δεν είναι σαφές εάν η ζύμωση της λακτόζης προκαλείται από θρεπτικά συστατικά, όπως η μαλτόζη ή η γλυκόζη, ή από ένα εξωτερικό ερέθισμα.

Αρκετά PTS είναι ικανά να μεταφέρουν δύο διαφορετικούς υδατάνθρακες. Ένα πρωτεολυτικό σύστημα γαλακτόκοκκων περιλαμβάνει τουλάχιστον 10-12 πεπτιδάσες. Μια γλουταμυλ αμινοπεπτιδάση ανακαλύφθηκε ως ένα από τα ένζυμα του γαλακτόκοκκου. Sullivan et al. ανέφερε ότι ένα μεταλλαγμένο στέλεχος λακτόζης, το BL385 (gnbC), ήταν σε θέση να αναπτυχθεί παρουσία LacNAc.

Η β-γαλακτοσιδάση από το L. casei ζυμώνει τη λακτόζη χρησιμοποιώντας την ίδια οδό με το LacNAc. Τα ένζυμα είναι ένας εξειδικευμένος μηχανισμός προσαρμογής για τη μείωση της κατανάλωσης ενέργειας σε ένα ανταγωνιστικό περιβάλλον. Τα προσαρμοστικά ένζυμα είναι επίσης απαραίτητα για την ανάπτυξη γαλακτοκομικών προϊόντων που έχουν υποστεί ζύμωση. Και αυτός είναι μόνο ένας από τους πολλούς τρόπους με τους οποίους τα προσαρμοστικά ένζυμα είναι ευεργετικά.

Συστατικά ένζυμα

Διάφορα στελέχη Τα gram-αρνητικά βακτήρια ζυμώνουν τη λακτόζη σε υγρά μέσα και, σε ορισμένες περιπτώσεις, το γαλακτικό οξύ που προκύπτει μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως λίπασμα. Η ενσωμάτωση του IPTG στο στερεό μέσο ζύμωσης επιτρέπει τη διαφοροποίηση των αργών ζυμωτών λακτόζης από πραγματικούς οργανισμούς αρνητικούς στη λακτόζη. Αυτό μπορεί να βοηθήσει στην έγκαιρη κλινική διάγνωση.

Ένα κύτταρο γαλακτοβάκιλλου παράγει μόνο μικροσκοπικές ποσότητες λακτόζης απουσία λακτόζης και αυξάνει την πρωτεϊνοσύνθεση σε 100-1000 φορές παρουσία λακτόζης. Τα επαγώγιμα βακτήρια που ζυμώνουν λακτόζη στερούνται ρυθμιστικών γονιδίων που είναι υπεύθυνα για την επαγωγή των πρωτεϊνών που ζυμώνουν λακτόζη. Ως εκ τούτου, παράγουν πάντα υψηλά επίπεδα βήτα-γαλακτοσιδάσης και γαλακτοσιδικής περμεάσης, παρά την έλλειψη των απαραίτητων ρυθμιστικών γονιδίων – τους κωδικούς οπερονίου lac για ρυθμιστικά και δομικά γονίδια που παίζουν ουσιαστικό ρόλο στη ζύμωση της λακτόζης.

Η ζύμωση της λακτόζης παράγει γαλακτικό οξύ, βασικό προϊόν του L. lactis και άλλων LAB. Ένζυμα που περιέχουν φώσφορο όπως η συνθάση της ακετολολακτικής, η αφυδρογονάση της α-ακετολολακτικής και η μυρμηκική πυροσταφυλική λυάση είναι ενεργά σε αερόβιες συνθήκες και χαμηλό pH. Αυτή η συνδυασμένη ζύμωση οδηγεί σε ακετυλιωμένα προϊόντα.

Ένα γενετικά τροποποιημένο εργοστάσιο γαλακτοκοκκικών κυττάρων έχει αναδειχθεί ως ένα αποτελεσματικό σύστημα μικροβιακής παραγωγής. Τέσσερα στελέχη γαλακτόκοκκου έχουν προσδιοριστεί ως προς την αλληλουχία τους και έχουν αναπτυχθεί διάφορα συστατικά συστήματα έκφρασης. Εκτός από πολλά συστατικά συστήματα έκφρασης, μπορούν να ανακαλυφθούν νέοι γαλακτοκοκκικοί προαγωγείς μέσω μιας οθόνης χρησιμοποιώντας γονίδια αναφοράς. Οι Ρ45 και Ρ32 χρησιμοποιούνται ευρέως ως ιδιοσυστατικοί γαλακτοκοκκικοί προαγωγείς, αλλά βρίσκονται ισχυρότεροι.

Δοκιμή ερυθρού

μεθυλίου Μια δοκιμή ερυθρού μεθυλίου για gram-αρνητικά βακτήρια ζύμωσης λακτόζης θα δώσει θετικό ή αρνητικό αποτέλεσμα παρουσία ή απουσία ινδόλης. Αυτή η δοκιμή διεξάγεται σε μέσο που περιέχει λακτόζη και χολικά άλατα. Αυτό το αντιδραστήριο αναστέλλει την ανάπτυξη θετικών κατά Gram βακτηρίων. Εκτός από τα χολικά άλατα, περιέχει κρυσταλλική βιολέτα και λακτόζη. Η ζύμωση της λακτόζης χαρακτηρίζεται από όξινο pH και έντονο ροζ χρώμα στις αποικίες. Αυτή η δοκιμή χρησιμοποιείται πιο συχνά για τη διαφοροποίηση μεταξύ Εντεροβακτηριδίων και Γαλακτοβακίλλων.

Αυτό το βακτήριο είναι ένας βάκιλος σε σχήμα ράβδου, gram-αρνητικός, που δεν σχηματίζει σπόρια, ζυμώνει τη λακτόζη και διάφορους υδατάνθρακες. Το προκύπτον μίγμα οξέος μπορεί να ανιχνευθεί με δοκιμή ερυθρού μεθυλίου ή άλλες μεθόδους. Μπορεί επίσης να αναγνωριστεί από την ικανότητά του να παράγει διακετύλιο και ακετοΐνη. Αυτές οι ενώσεις έχουν διαφορετικές ιδιότητες, επομένως εάν υποψιάζεστε μόλυνση από E. coli, μια δοκιμή ερυθρού μεθυλίου θα είναι χρήσιμη.

Χρησιμοποιώντας ένα ζωμό MR-VP, χωρίστε τον ζωμό MR-VP σε δύο σωληνάρια. Εμβολιάστε το ένα σωληνάριο με Escherichia coli και το άλλο με Enterobacter cloacae. Προσθέστε το κόκκινο του μεθυλίου σε μία γραμμή. Ένα θετικό αποτέλεσμα σημαίνει ότι ο ζωμός MR-VP περιέχει Escherichia coli. Ο ζωμός MR/VP θα είναι κόκκινος εάν υπάρχει Escherichia coli.

Δοκιμή

ινδόλης Η δοκιμή ινδόλης χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό αρνητικών κατά Gram βακτηρίων που ζυμώνουν λακτόζη. Αυτή η δοκιμή είναι θετική εάν τα βακτήρια παράγουν ροζινδόλη και χρησιμοποιείται για τη διαφοροποίηση μεταξύ των στελεχών E. coli, Vibrio και Plesiomonas. Οι θετικές καλλιέργειες θα έχουν κόκκινο δακτύλιο εάν τα βακτήρια ζυμώσουν τη λακτόζη. Αυτή η δοκιμή μπορεί επίσης να είναι επιζήμια για ορισμένα στελέχη.

Μια δοκιμή ινδόλης μπορεί να πραγματοποιηθεί χρησιμοποιώντας ένα μέσο άγαρ αίματος, στο οποίο το αντιδραστήριο Kovac προστίθεται στην επιφάνεια του άγαρ. Το χρώμα αλλάζει σε έντονο κόκκινο εάν υπάρχει ινδόλη. Η ένωση είναι τετραμεθυλ-ρ-φαινυλενοδιαμίνη και είναι εμφανής όταν ανάγεται. Σε οξειδωμένη κατάσταση, γίνεται μοβ. Αυτό το χρώμα υποδηλώνει την παρουσία τρυπτοφάνης, η οποία είναι υπεύθυνη για τη διάσπαση της τρυπτοφάνης σε διάφορα συστατικά.

Η δοκιμή ινδόλης για gram-αρνητικές λακτόζες είναι μια απλή μέθοδος αναγνώρισης της παρουσίας βακτηριακής καλλιέργειας. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί ένα διαφορικό μέσο που περιέχει κρυσταλλική βιολέτα και χολικά άλατα. Ο ουδέτερος κόκκινος δείκτης pH θα γίνει ροζ όταν υπάρχουν αρνητικά κατά Gram βακτήρια και η δοκιμή μπορεί επίσης να διαφοροποιήσει τα θετικά κατά gram και τα εντεροβακτηρίδια αρνητικών κατά gram.

Shigella Το

Shigella είναι ένας gram-αρνητικός, μη κινητικός βάκιλος που σχετίζεται με το E. coli αλλά δεν ζυμώνει τη λακτόζη. Αυτά τα βακτήρια παράγουν οξύ και χρησιμοποιούν γλυκόζη και άλλους υδατάνθρακες ως πηγές άνθρακα. Ωστόσο, ορισμένοι βιότυποι Shigella πληρώνουν επίσης αέριο, όπως η μαννιτόλη. Ωστόσο, οι περισσότερες περιπτώσεις της νόσου σχετίζονται με τον ανθρώπινο πληθυσμό.

Τα βακτήρια που προκαλούν σιγκέλλωση είναι γνωστά κυρίως για την ικανότητά τους να προκαλούν ασθένειες. Ωστόσο, το δυναμικό της στη βιοτεχνολογία είναι περιορισμένο. Η εξελικτική πορεία αυτού του βακτηρίου από το commensal E. coli στην παθογόνο Shigella είναι αβέβαιη. Αν και είναι ένα δυνητικά θανατηφόρο παθογόνο, δεν χρησιμοποιείται επί του παρόντος για βιοτεχνολογικούς σκοπούς. Το E. coli ενέπνευσε την εξέλιξή του.

Τα βακτήρια μπορούν να ζήσουν σε θερμοκρασία από έξι έως 48 βαθμούς Κελσίου και pH από 4,8 έως 9,3. Μπορεί να επιβιώσει στα τρόφιμα για αρκετές ημέρες, ακόμη και όταν δεν έχει εντοπιστεί το τροφικό όχημα για το ξέσπασμα. Το Shigella flexneri και το sonnei μπορούν να ζήσουν σε τρόφιμα για αρκετές ημέρες, αλλά σπάνια αναπτύσσονται σε μεγάλους αριθμούς. Επομένως, Shigella spp. Πρέπει να καλλιεργηθεί για τουλάχιστον δύο εβδομάδες.

Σε αντίθεση με το E. coli, τα είδη Shigella ζυμώνουν τη λακτόζη πολύ πιο αργά από τα αντίστοιχα βακτήρια E. coli. Αν και το γονίδιο lacZ του βακτηρίου κωδικοποιεί τη βήτα-D-γαλακτοσιδάση, το γονίδιο EFTA-C (lacY) κωδικοποιεί τη λειτουργία μεταφοράς γαλακτόζης. Ωστόσο, πολλά από αυτά τα γονίδια είναι ψευδογονίδια, τα οποία είναι γενετικές αλληλουχίες διάσπαρτες σε όλο το γονιδίωμα.

Σαλμονέλα

Ένα τετράχρονο αγόρι εμφανίζει αιματηρή διάρροια τα τελευταία 24ωρα. Προηγουμένως ήταν υγιής, αλλά άρχισε να βιώνει πόνους στην κοιλιά και πυρετό χθες. Είχε εννέα επεισόδια διάρροιας τις προηγούμενες 24 ώρες. Ένα αγοράκι δύο ετών έκανε κόπρανα πριν πάει στην τουαλέτα, υποδεικνύοντας μια επιπλέον πηγή μόλυνσης. Το αγόρι δεν έχει προηγούμενο ιστορικό ασθένειας ή άλλων ιατρικών προβλημάτων και πηγαίνει σε παιδικό σταθμό. Αυτός και η μητέρα του έχουν μια γάτα και έναν σκύλο, που είναι η πηγή της διάρροιας του. Ενώ η υποστηρικτική φροντίδα είναι απαραίτητη, η αντιβιοτική θεραπεία δεν συνιστάται καθώς μπορεί να παρατείνει τη μεταφορά αυτού του παθογόνου.

Τα βακτήρια καλλιεργήθηκαν σε άγαρ MRS για να προσδιοριστεί η κατάσταση ζύμωσης κατά Gram αρνητικής λακτόζης στο εργαστήριο. Η ανάπτυξη βακτηρίων που ζυμώνουν λακτόζη είναι ένα λειτουργικό βιοχημικό τεστ για τους βακτηριολόγους. Τα βακτήρια που ζυμώνουν λακτόζη μπορούν να διακρίνουν την Escherichia coli από την αρνητική κατά gram Salmonella. Τα περισσότερα υλικά διαφορικής επιμετάλλωσης περιέχουν λακτόζη.

Τα βακτήρια που ζυμώνουν τη λακτόζη είναι γνωστά ως εντερικά βακτήρια που ζυμώνουν τη λακτόζη. Αυτά τα βακτήρια παράγουν λακτόζη στο μέσο τους και θα αναστείλουν την ανάπτυξη άλλων θετικών κατά Gram βακτηρίων. Ωστόσο, το σύμπλεγμα οξέος και δείκτης που παράγεται από βακτήρια που δεν ζυμώνουν λακτόζη θα δημιουργήσει ροζ-κόκκινες αποικίες. Αυτός είναι ένας σαφής δείκτης βακτηρίων που ζυμώνουν λακτόζη.

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *